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成熟的耳片要及時采摘。子實體成熟的標準是顏色由深轉淺，耳片舒展變軟，肉質肥厚，耳根收縮，子實體腹面產生白色孢子粉。段木栽培從耳芽發生到成熟大約需6—7天，袋栽一般兩個星期。但栽培袋所處的位置不一致，成熟時間也不一致，故需分批采收。

室外栽培的最好在雨過天晴或晴天的早晨采摘為宜，如遇雨天成熟的應突擊采收，盡量避免損失。陰天不下雨時可以整天采收。室內栽培則不受天氣限制。

采摘時用手抓住整朵木耳輕輕拉下，或用小刀沿壁削下，切忌留下耳根，以免腐爛發霉，發生爛根流耳，孽生雜菌，影響下一批出耳。總的要求是：勤摘、細揀、不使流耳。段木栽培春耳和秋耳要揀大留小，伏耳則要大小一起采。

采收下來的木耳，用清水洗凈泥沙雜質，然后在烈日下曬干，若遇陰雨則應及時烘干。烘曬時應單層攤放，互不重疊以免粘連。未干之前不宜翻動，以免耳片卷成拳耳，影響產口質量。黑木耳的干品，應密封在無毒的塑料袋內，以防吸潮變質。凡裝過農藥、化肥、化學藥品及其它有害物質的包裝袋，不能用于包裝黑木耳。